РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК
Государственное учреждение Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН
(ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН)
ОТЧЕТ
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БАКСИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЖЕНЩИН,
СТРАДАЮЩИХ ХРОНИЧЕСКИМИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ
ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЖЕНСКОЙ ПОЛОВОЙ СФЕРЫ
Москва 2002 год
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы хронических воспалительных заболеваний придатков, имеющей большое медицинское и социальное значение, обусловлена ростом их удельного веса в структуре акушерско-гинекологической патологии. Заболевания, передающиеся половым путем, ответственны за многие нарушения репродуктивной функции человека. Инфекции, вызываемые Chlamidia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealiticum, Gardnerella vaginalis могут протекать бессимптомно или проявляться в виде уретрита, эндоцервицита, хориоамниотита, воспалительных заболеваний органов малого таза, обусловливая бесплодие [3]. Хронические воспалительные процессы сопровождаются выраженными иммунодефицитными состояниями [4, 6]. Существующие методы лечения данной патологии не гарантируют полного излечения и, кроме этого, использование антибиотиков, в свою очередь, усугубляет иммунодефицитное состояние организма, что требует дополнительной коррекции. Благодаря возросшему интересу к этим заболеваниям усовершенствовались диагностические и лечебные методы. Постоянно ведутся поиски новых более эффективных средств терапии хронических воспалительных заболеваний придатков.
Биологически активная добавка (БАД) к пище, нутрицевтик Баксин представляет собой высушенную массу выращенных в водно-минеральной питательной среде и инактивированных клеток микроорганизма Halobacterium Halobium 353П, обитающих в соленых водах некоторых озер. Баксин обладает иммуномодулирующей активностью и, кроме этого, включает в себя спектр жизненно важных витаминов, микроэлементов, липидов [1]. Использование Баксина для лечения
легочных хламидиозов дало положительные результаты [3] и явилось основанием для планированной данной работы.Цель работы заключалась в оценке нутрицевтика Баксина по клинической эффективности, элиминации патогенов, состоянию иммунной и интерфероновой систем в результате лечения женщин, страдающих хроническими воспалительными заболеваниями придатков.
Материалы и методы.
Отбор больных и схема лечения.
В группу были включены 30 женщины в возрасте 17-43 лет (23+/-4,6 лет), давность заболевания составляла у 10 больных от года до 2 лет, у 5 больных - от 2 до 3 лет и у остальных больных - более 3 лет. Средняя частота рецидивов составляла 2,1+/-0,8 раз в год. У всех больных был болевой симптом разной степени выраженности, а также выделения воспалительного характера из половых путей. 47,3% женщин предъявляли жалобы на чувство жжения, зуд и дизурические расстройства. У 30% женщин заболевание сочеталось с нарушением менструального цикла по типу менометроррагий. 3 из 13 женщин, не применявших средства контрацепции (23%
), страдали бесплодием II. У 70% больных наблюдался субфибрилитет - 37,2°+/-0,1. Сразу после предварительного обследования и в случае наличия патогенов в отделяемом шейки матки и крови больные 1 группы получили лечение препаратом Баксин по схеме: 2 таблетки 3 раза в день после еды в течение месяца. Через две-три недели после завершения лечения больные были обследованы повторно на наличие патогенов. Кроме этого, до лечения и через 2 недели после его окончания исследовали функциональное состояние иммунной и интерфероновой систем больных путем определения иммунного и интерферонового статуса и наличия дисбактериоза в образцах кала, В случае повторного обнаружения патогенов больных лечили антибиотиком рулидом в течение 10 дней. 2 группу больных составляли больные, которых лечили антибиотиком рулидом по схеме: в течение 10 дней, через 2 недели определяли наличие патогенов в отделяемом шейки матки, исследовали кровь на иммунный и интерфероновый статус и, при иммуносуппрессии, назначали повторный курс Баксина. По окончании лечения больных 2 группы определяли наличие патогенов в отделяемом шейки матки, исследовали кровь на иммунный и интерфероновый статус.Определение спектра патогенов в материале, полученном из шейки матки и крови.
Отделяемое из шейки матки получали по методу [8] в 1 мл физ. раствора. Кровь (1мл) отбирали в пробирки с 40 мкл 0,5М ЕДТА, рН 7.0. Использовали метод полимеразной цепной реакции [5] для тестирования патогенов: в отделяемом шейки матки-Chlamidia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma ure
aliticum, Gardnerella vaginalis и в крови -Cytomegalovirus.Характеристика функционирования системы интерферона (интерфероновый статус).
Исследовали образцы гепаринизированной крови до начала лечения и после его завершения. Форменные элементы крови освобождали от плазмы центрифугированием при 1000 об/мин в течение 10 мин, лейкоциты доводили до концентрации 1,5х10
6/мл средой RPMI-1640 и затем культивировали с сывороткой эмбрионов коров (ЭС) или аутологичной сывороткой (АС). В лейкоцитах индуцировали продукцию альфа (вирус болезни Ньюкастла, 25 БОЕ/клетка) и гамма (фитогемагглютинин, 10 мкг/мл) интерферона или же лейкоциты культивировали без индуктора. Культуральную жидкость, содержащую альфа интерферон (ИФН), отбирали после 24 часов культивирования лейкоцитов и обрабатывали 0,1N HCI в течение не менее 5 дней для инактивации вируса, затем доводили концентрацию водородных ионов до нейтрального значения О,1N NaOH, Культуральную жидкость, содержащую гамма ИФН, отбирали после 72 часов культивирования лейкоцитов. Титр интерферона определяли в культуре диплоидных фибробластов человека по подавлению цитопатического действия 100 доз индикаторного вируса энцефаломиокардита мышей [9].Характеристика функционирования иммунной системы (иммунный статус).
Иммуномодулирующую активность препаратов определяли в соответствии с методическими рекомендациями по оценке иммунного статуса человека, разработанными сотрудниками Института иммунологии МЗ РФ [6]. Все лица в опытных и контрольных группах были обследованы по единой схеме, включающей определение числа лейкоцитов и лимфоцитоэ, Т-лимфоцитов и их субпопуляций, иммунорегуляторного индекса, содержания В-лимфоцитов, ЕК-естественных киллеров, иммуноглобулинов классов A,M,G, ЦИК и показателей фагоцитоза, т.е. параметров, отражающих функции основных звеньев иммунной системы (клеточного, гуморального, фагоцитарного).
РЕЗУЛЬТАТЫ
После курсового лечения Баксином у всех больных отмечено улучшение клинического состояния: исчезновение воспалительных выделений, ощущения зуда, жжения, дизурических явлений; болевой симптом сохранился только у 2 пациенток, но стал менее выраженным. Отмечена нормализация менструального цикла (Таблица 1).
Таблица 1. Изменение клинических проявлений воспалительного процесса после лечения Баксином
|
Симптомы |
До лечения |
После лечения |
|
Боли |
19* |
2 |
|
Выделения воспалительного характера |
19 |
2 |
|
Субфебрилитет |
15 |
2 |
|
Субъективное чувство жжения и зуда |
9 |
2 |
|
Дизурические явления |
9 |
2 |
|
Нарушение менструального цикла |
6 |
0 |
|
Бесплодие II |
З из 13 |
2 из 13 |
Обозначения: * - количество больных с данным симптомом
Результаты тестирования патогенов в отделяемом шейки матки представлены в таблице 2.
Таблица 2. Обнаружение патогенов в отделяемом из шейки матки и в крови больных до и после лечения Баксином
|
N п/п |
Патоген |
Количество до лечения |
Количество после лечения |
Процент элиминации |
|
1 |
Chlamidia trachomatis |
7 |
1 |
85 |
|
2 |
Mycoplasma hominis |
5 |
1 |
80 |
|
3 |
Ureaplasma urealiticum |
5 |
0 |
100 |
|
4 |
Gardnerella vaginalis |
14 |
8 |
50 |
|
5 |
Cytomegalovirus (кровь) |
3 |
1 |
60 |
Лечение Баксином привело к активной элиминации патогенов из щейки матки и крови больных хроническими аднекситами. Ureaplasma urealitiqum была элиминирована из матки у 100% больных, хламидии и микоплазмы) не обнаруживались у 80-84% больных после лечения, и у 27% больных не обнаруживались только гарднереллы. Цитомегаловирус не обнаруживался в крови 60% больных после лечения баксином.
Следовательно, лечение баксином приводит к элиминации патогенов из шейки матки.
Далее представлены результаты исследования влияния баксина на иммунный статус больных (таблица 3).
Показатели иммунного статуса у больных до и после лечения Баксином меняются, однако, находятся в рамках нормальных показателей. Статистически достоверные изменения показателей связаны со снижением процента лимфоцитов крови. Однако, при использовании маркеров лимфоцитов отмечено увеличение CD3 клеток (общий пул лимфоцитов) с одновременным увеличением CD4 клеток (хелперы) и уменьшением СD8 клеток (супрессоры), что отразилось в индексе CD4/CD8, уровень которого статистически достоверно увеличился. Эти результаты указывают на включение в инфекционный процесс под влиянием Баксина клеточного звена иммунитета - Т-хелперов. Достоверное увеличение нейтрофилов в крови может служить дополнительным показателем способности организма к элиминации патогенов.
Таблица 3. Показатели иммунного статуса у больных до и после лечения Баксином
|
Показатели |
До лечения |
После лечения |
Индекс достоверности |
Норма |
|
Лейкоциты, 10 9/л |
5,79±0,41 |
6,63 ±0,47 |
0,09 |
4,5-9,5 |
|
Лимфоциты, 10 9/л |
2,26±0,19 |
1,97±0,18 |
0,13 |
0,8-3,6 |
|
Лимфоциты, % |
39,1±1,8 |
29,7±1,9 |
0,001* |
18-38 |
|
Нейтрофилы, 10 9/л |
3,53±0,27 |
4,64±0,35 |
0,012* |
1,9-6,5 |
|
CD 3, % |
60,1±1,8 |
68,0±1,1 |
0,0005* |
55-80 |
|
CD 3, абс. |
1350,6±115,4 |
1340,0± 127,5 |
0,47 |
800- 2200 |
|
CD 4, % |
33,4±0,7 |
39,5±1,5 |
0,0034* |
31-49 |
|
CD 4, абс. |
756,5±60,5 |
779,5±81,2 |
0,4 |
600-1600 |
|
CD 8, % |
21,3±1,1 |
18,3±0,8 |
0,23 |
19-37 |
|
CD 8, абс. |
469,0±38,5 |
360,2±35,7 |
0,026* |
300-800 |
|
CD 19, % |
8,8±1,6 |
7,8±2,5 |
0,3 |
5-19 |
|
CD 19, абс. |
186,4±30,5 |
156,2±56,6 |
0,32 |
100-500 |
|
CD 16, % |
12,7±1,5 |
12,7±1,1 |
0,4 |
5-19 |
|
CD 16, абс. |
292,5±44,7 |
254,5±50,4 |
0,29 |
100-500 |
|
CD4/CD8 |
1,64±0,09 |
2,18±0,3 |
0,0023* |
1,2-2,5 |
|
IgA, г/л |
1,937±0,25 |
2,022±0,157 |
0,38 |
0,5-3,5 |
|
IgM, г/л |
1,500±0,201 |
1,007±0,132 |
0,026* |
0,5-2,5 |
|
IgG, г/л |
10,779±1,048 |
12,560± 1,579 |
0,18 |
7,8-22,0 |
|
Фагоцитарный, латекс-тест, % |
53,3±1,8 |
50,5±4,3 |
0,2 |
40-82 |
|
ЦИК с 3% ПЭГ |
0,0337±0,0011 |
0,0283±0,0059 |
0,2 |
0,035-0,043 |
|
ЦИК с 4% ПЭГ |
0,0744±0,0014 |
0,0742±0,0015 |
0,46 |
0,067-0,079 |
Обозначения: * - разница статистически достоверна
Следовательно, лечение баксином приводило к активации и нормализации показателей иммунного статуса у больных.
Результаты исследования влияния Баксина на состояние системы интерферона у больных представлены в таблице 4.
Таблица 4. Показатели интерферонового статуса у больных до и после лечения Баксином
|
ИФН |
До лечения |
После лечения |
Критерий достоверности |
Норма |
|
Сывороточный |
3,6±1,0 |
6,9±3,2 |
0,1858 |
2-4 |
|
Спонтанный |
<2 |
<2 |
. |
<2 |
|
Альфа - 1 |
612,6±78,4 |
352,0±112,8 |
0,038* |
256 и выше |
|
Альфа - 2 |
802,1±74,4 |
475,4±149 |
0,03* |
256 и выше |
|
Гамма- 1 |
59,1±3,3 |
45,4±8,3 |
0,08 |
64 и выше |
|
Гамма -2 |
58,7±3,6 |
58,1±6,0 |
0,46 |
64 и выше
|
Обозначения: 1 - продукция ИФН с сывороткой эмбрионов коров
2 - продукция ИФН с аутологичной сывороткой
* - разница статистически достоверна
Видно, что показатели интерферонового статуса у больных как до лечения Баксином, так и после его окончания близки к нормальным, за исключением некоторого незначительного снижения продукции гамма интерферона (ИФН
g ) лейкоцитами крови in vitro с эмбриональной сывороткой коров (ЭС) и аутологичной сывороткой больных (АС). Продукция альфа интерферона (ИФНa ) лейкоцитами крови in vitro так находится в рамках нормальной, однако, отмечается достоверное снижение показателей в результате лечения Баксином. Такое снижение может быть, связано с механизмом действия препарата - индукцией выработки ИФН в организме, так как лейкоциты, контактировавшие с ИФН, при повторной его индукции in vitro могут реагировать сниженным синтезом. Показатели интерферона в крови больных имели тенденцию к увеличению после лечения больных, хотя разница была статистически не достоверной. Состояние микробиоценоза влагалища в результате лечения баксином представлено в таблице 5.Таблица 5. Микробиоценоз влагалища больных хроническими аднекситами после лечения Баксином.
|
Показатель |
До лечения |
После лечения |
Индекс достоверности |
Показатель нормы |
|
эпителий |
2,2±0,6 |
1,0 |
0,06 |
до 5 |
|
лейкоциты |
18,1±2,4 |
5,7±1,0 |
0,02* |
3-5 |
|
эритроциты |
1,4±0,7 |
0,2±0,2 |
0,12 |
1,0 |
|
микрофлора палочки, % |
24,5±5 |
89±8 |
0,0003* |
до 5 |
|
микрофлора кокки, % |
60±6 |
3,5±0,5 |
0,0003* |
до 5 |
|
трихомонада |
- |
- |
. |
- |
|
гонококки |
- |
- |
. |
- |
|
ключевые клетки |
3,8±1 |
0 |
0,03* |
0 |
|
грибы, рода Candida |
0,5±0,3 |
0,1±0,1 |
0,55 |
0 |
Обозначения: * - разница статистически достоверна
Из данных таблицы видно, что лечение баксином привело к статистически достоверному снижению показателей числа лейкоцитов, кокковидных форм бактерии, ключевых клеток в отделяемом шейки матки и имелась тенденция к снижению числа грибов рода сandida.
Следовательно, лечение баксином привело к нормализации показателей микробиоценоза влагалища.
Состояние микробиоценоза кишечника в результате лечения баксином представлено в таблице 6.
Из данных таблицы видно, что лечение баксином привело к статистически достоверному увеличению кишечной палочки и статистически достоверному снижению процента кишечная палочка со слабо выраженными ферментативными свойствами и процента кокковых форм микробов в общей сумме микробов.
Таблица 6. Микробиоценоз кишечника больных хроническими аднекситами после лечения Баксином.
|
Микрофлора |
До лечения |
После лечения |
Индекс достоверности |
Показатель нормы |
|
Патогенные микробы семейства кишечных |
- |
- |
. |
- |
|
Общее количество кишечной палочки |
254±10 |
355±4 |
0,0005* |
300-400 |
|
Кишечная палочка со слабо выраженными ферментативными свойствами, % |
12,8±1,1 |
7,7±0,7 |
0,04* |
До 10 |
|
Лактозонегативные энтеробактерии, % |
0 |
42±16 |
0,02* |
До 5 |
|
Гемолизирующая кишечная палочка |
- |
- |
. |
- |
|
Кокковые формы в общей сумме микробов, % |
24,3±1 |
14,2±1 |
0,0015* |
До 25 |
|
% гемолитического стафилококка ко всем кокковым формам |
- |
- |
. |
- |
Обозначения: * - разница статистически достоверна
Следовательно, лечение баксином женщин, страдающих хроническими аднекситами, привело к нормализации показателей биоценоза кишечника.
Лечение больных с хроническими сальпингоофоритами антибиотиком рулид (контрольная группа больных) не привело к полному освобождению организма женщин от патогенов: отмечена 75% элиминация хламидий и 80% элиминация гарднерелл из отделяемого шейки матки. Однако в отличие от лечения Баксином, лечение рулидом не привело к активации иммунной системы в организме больных и не повлияло на показатели интерферонового статуса. В дополнение к этому увеличился дисбактериоз кишечника. Вследствие этого, лечение больных контрольной группы было продолжено: больные получили курсовое лечение Баксином, которое активировало функционирование иммунной и интерфероновой систем, способствовало дополнительной элиминации патогенов из отделяемого шейки матки и нормализовало нарушения функционирования иммунной и интерфероновой систем.
ВЫВОДЫ
Литература
1.Акопян В.Б. "Баксин" Москва, 2000.
2.Дидковский Н.А., Малашенкова И.К., Азизова О.А. и др. Баксин в лечении хронических герпетических инфекций. Альтернативная медицина 2002; принята к опубликованию.
З.Малинина Э.В. Сравнительная оценка различных методов диагностики и терапии урогенитального хламидиоза у женщин репродуктивного возраста. Автореф. дис. канд. мед. наук. Москва 1997.
4.Петров Р.В., Лопухин Ю.М., Чередеев С.Н. и др. Оценка иммунного статуса человека: методические рекомендации. Москва Медицина: 1994.
5.Щегловитова О.Н., Максянина Е.В., Растегаева И.Н., Флуер Ф.С. Особенности интерферонового статуса при генитальных инфекциях. Вопросы вирусологии 2001; 46: 2: 36-38.
6.Kutten W.H., Prince S.J., Hammond K.R., Kutten C.C. Clin.Exp. Immunol.l996;104:538-542.
7.Scheglovitova O.N., Balabanova R.M., Kulieva A.M., Seilanov L.S., Anikina N.V., Orlova Т.G. Interferon system in patients with Rheumatoid Arthritis and Scleroderma
Systematica Acta virologica 1993; 37: 54-60.
Ведущий научный сотрудник, Доктор медицинских наук __________ О.Н. Щегловитова